SANITATION OF SWEET CHERRIES IN IN VITRO CULTURE USING CHEMOTHERAPY
Lucie Plecitá
VÝZKUMNÝ A ŠLECHTITELSKÝ ÚSTAV OVOCNÁŘSKÝ HOLOVOUSY s. r. o., Holovousy 129, 508 01
e-mail: plecita@vsuo.cz, ORCID: 0009-0008-0748-0920
VPO 31(1): 10–21, 2025
Accepted: 15. 4. 2025
Published: 7. 5. 2025
ABSTRAKT
Třešeň ptačí patří mezi ekonomicky významné ovocné druhy, které jsou stejně jako mnoho dalších kulturně pěstovaných ovocných dřevin, napadány virovými patogeny. Jednou z možností, jak efektivně eliminovat virové částice z infikovaných jedinců, je aplikace chemoterapie v in vitro kultuře. Cílem práce byla eliminace viru zakrslosti slivoně (PDV) ze tří genotypů třešní, vybraných z pokusné výsadby VŠÚO v Holovousích. V rostlinném materiálu byl testováním metodou ELISA detekován virus PDV bez dalších směsných virových infekcí. Z dormantních výhonů odebraných v únoru 2018 byla založena aseptická in vitro kultura, která po dostatečném namnožení rostlinného materiálu sloužila k vlastní chemoterapii. K ozdravování infikovaných explantátů bylo použito nukleosidové antivirotikum ribavirin používané v humánní medicíně. Koncentrace antivirotika byla stanovena na 40 mg·l-1 a 80 mg·l-1 a časový interval ozdravování 30 dní. Po ozdravování byly explantáty subkultivovány na modifikovaném kultivačním médiu typu MS se 4 mg·l-1 BAP, kde po dobu dalších 30 dní probíhala regenerační fáze. PDV se podařilo eliminovat při koncentraci 40 mg·l- 1 z většiny rostlin. Při koncentraci antivirotika 80 mg·l-1 se podařilo virové částice z rostlinného materiálu taktéž odstranit, ale citlivost rostlin na ozdravování byla natolik vysoká, že není zcela vhodné ji aplikovat bez předchozích testů na fytotoxicitu jednotlivých genotypů.
Klíčová slova: Prunus avium, meristémy, antivirotikum, virus, koncentrace
ABSTRACT
Sweet cherry is one of the economically important fruit species that, like many other cultivated fruit trees, are attacked by viral pathogens. One of the options for effectively eliminating viral particles from infected individuals is the application of chemotherapy in in vitro culture. The aim of the work was to eliminate Prunus dwarf virus (PDV) from three cherry genotypes selected from the experimental orchard of the VŠÚO in Holovousy. The presence of PDV, without any mixed viral infections, was detected in the plant material by ELISA testing. An aseptic in vitro culture was established from dormant shoots collected in February 2018, which, after sufficient multiplication of the plant material, was used for its own chemotherapy. The nucleoside antiviral ribavirin used in human medicine was used to treat infected explants. The concentrations of the antiviral agent were set at 40 mg·l-1 and 80 mg·l-1 and the sanitation period of 30 days. Following the sanitation treatment, explants were subcultured onto a modified MS medium containing 4 mg·l-1 BAP, where a 30-day regeneration phase took place. PDV was successfully eliminated from the majority of plants at the 40 mg·l-1 ribavirin concentration. At 80 mg·l-1 viral particles were also eliminated; however, the sensitivity of the plants to the treatment was so high that this concentration is not entirely suitable for use without prior phytotoxicity testing for individual genotypes.
Keywords: Prunus avium, meristem, antivirotics, virus, concentration
